、流動相的改變。

14.改變填料孔徑大小對液相色譜分離有什么影響

？

填料孔徑越小

，允許的流動相線速度越高。最佳流動相線速度取決于固定相的顆粒大小。在最佳線速度時，色譜柱生成的理論塔板數(shù)最多。對于內徑為 4.6mm 的色譜柱，10um 的顆粒流動相線速度為 0.75ml/min 或 5um 的顆粒流動相線速度為 1.5ml/min 時，塔板數(shù)最多。

15.改變色譜柱直徑對液相色譜分析有什么影響

？

如果色譜柱直徑減半

，則靈敏性增加四到五倍（假設進樣量不變）。例如，等量的樣品進樣到內徑為 2.1mm 的色譜柱比進樣到內徑為 4.6mm 的色譜柱所生成的峰高 5 倍左右。 只要線性流動保持不變，則柱效率、理論塔板數(shù)、反壓和分析時間等參數(shù)均與色譜柱內徑的減小無關。

16.改變填料顆粒大小和色譜柱的長度對液相色譜分離有什么影響？

如果填料顆粒大小減半

，則理論塔板數(shù)加倍（假設柱長不變）。如果填料顆粒大小減半，則柱壓增加為原來的四倍。 如果柱長加倍，則理論塔板數(shù)加倍。如果柱長加倍，則分析時間加倍。隨著柱長增加，柱壓也線性地增加。 以下是一個根據(jù)上述信息選擇色譜柱的示例： 一個裝填 10um 填料的長度為 200mm 的色譜柱可生成 6000 塊理論塔板，這是在很多情況下能提供比較適當?shù)姆蛛x的色譜柱效率。將顆粒大小由 10um 減小到 5um，柱長仍為 200mm，則可生成 12000 塊理論塔板。然而，這個色譜柱可生成相當于原來四倍的柱壓。通常情況下不需要生成 12000 塊塔板，因此柱長可減半至 100mm，結果生成 6000 塊塔板，同時分析時間也縮短一半；柱壓僅比最初裝填 10um 填料的長度為 200mm 的色譜柱高兩倍。

17.能否提供一種與我使用的LC色譜柱相同的色譜柱？

即使用同一種固定相

，不同廠商的液相色譜柱也可能具有不同的保留時間